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WB實驗樣本的保存方法簡單介紹

Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然後利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。

與Southern或Northern雜交方法類似,但WB採用的是聚丙烯醯胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,「探針」是抗體,「顯色」用標記的二抗。

經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用於檢測蛋白水平的表達。

以上就是WB實驗原理的一些介紹,大家都很熟悉就不多再贅述。下面總結了一些WB實驗的樣本保存方式,具體如下:

一,已提取好的蛋白樣本,負80度保存,乾冰運輸。

二,血清樣本,負80度保存,乾冰運輸。

三,組織樣本,凍存管或乾淨滅菌的EP管,負80度保存,乾冰運輸。

四,細胞樣本,胰酶消化後的細胞,負80度保存。


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