號外-景傑生物正式開通外泌體蛋白質組／修飾組學服務啦！

景傑編者按：

作為蛋白質組學科研服務領域的領跑者，景傑生物一直致力於為客戶提供最專業、 深入的蛋白組學／修飾組學的技術服務。我們秉承著「一流人才、一流技術、一流效率」的理念，以「精準醫療」驅動人類健康事業為己任，致力將蛋白質組學技術引入更多的生物學研究領域，服務於有需求的科研工作者。如今我們要開展外泌體的蛋白質組學及修飾組學技術服務啦！

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什麼是外泌體

外泌體（Exosome）是一種由細胞分泌的膜性囊泡小體，其直徑通常為30-100 nm，比其它的一些囊泡（凋亡小體）要小得多。外泌體廣泛存在於各種體液中，可攜帶蛋白質、脂類、核酸（miRNAs，ncRNAs）等多種生物功能大分子。最新的研究表明，外泌體形成了一種特殊的細胞間信息傳遞系統，它不僅影響細胞的生理狀態，而且還與多種疾病的發生與發展密切相關。外泌體領域的研究已經在癌症的診斷及治療等領域發揮重要作用，基於質譜的高通量蛋白質組學是研究外泌體不可或缺的一項技術手段。

外泌體具有磷脂雙分子膜結構，導致其沉降係數和蛋白質聚集體有著很大的不同。而且外泌體膜表面存在特異性膜蛋白如CD9和CD81，前者被證實和腫瘤遷移有關，後者與丙型肝炎病毒的侵染有關。而因為外泌體具有這些顯著的易分離的特點，我們可以通過密度梯度離心，親和層析等方法對外泌體進行分離和純化。

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研究方法

如下圖所示，質譜技術可以用於研究外泌體中的成分：蛋白質，脂類和小分子化合物。而利用蛋白質質譜技術，我們可以鑒定外泌體中的蛋白組成並對蛋白進行定量分析。

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我們的技術優勢

我們擁有Label free、SILAC、TMT/iTRAQ三種技術研究外泌體定量蛋白質組。

Label free的方法無需同位素標記試劑，並且不受樣本條件的限制，但準確性會受到質譜重複性等因素的影響；

SILAC技術屬於體內標記技術，標記效果穩定，標記效率高達99%，並不受裂解液成分的影響；

TMT/iTRAQ屬於體外標記技術，標記靈敏度高，重複性好，覆蓋度高。且TMT標記平行比較多達10個樣品！

案例分享

案例一 腫瘤轉移: 外核體的特殊靶標或可預測癌症的轉移走向

Tumor exosome integrins determine organotropic metastasis.Nature. 2015, 527(7578):329-35.

1，示蹤實驗證實，具有特定轉移傾向的腫瘤細胞來源的外泌體，優先被定居細胞攝取；

2，腫瘤細胞在轉移前先釋放外泌體，外泌體到達預期轉移器官後會被相應的細胞攝取，進而改變這些靶細胞的狀態；

3，利用定量蛋白質組學技術，發現外泌體表面的整合素類蛋白質在轉移過程中發揮著重要的作用，並決定著靶器官的特異性。如整合素α6 β4 和α6 β1與肺部的轉移有關整合素αv β5則與肝臟的轉移相關。

案例二 免疫調控: 布氏錐蟲通過細胞外囊泡傳遞毒力因子而引起宿主貧血症

Extracellular vesicles from Trypanosoma brucei ediate virulence factor transfer and cause host anemia.Cell. 2016, 164(1-2):246-257.

1，錐蟲的鞭毛膜產生膜納米管並分解成游離的胞外小泡。致病錐蟲通過外泌體傳遞毒力因子，對人體先天免疫產生抗性；

2，錐蟲細胞外囊泡還可以與哺乳動物的紅細胞融合，造成紅細胞被迅速清除，從而導致貧血。這些數據表明，錐蟲細胞外囊泡是一種細胞器，可介導非遺傳性毒力因子的轉移，使宿主紅細胞重構，從而導致貧血。

案例三 植物外泌體: 外泌體蛋白參與植物對病原菌侵染的相應

Extracellular vesicles isolated from the leaf apoplast carry stress-response proteins.Plant Physiol. 2016, 173(1): 728-741.

1，研究者採用不連續對的密度梯度離心從GFP-PEN1轉基因植株葉片中分離了胞外囊泡（EVs），利用質譜技術從EVs中鑒定到598個蛋白。將鑒定的蛋白進行基因注釋，結果表明有26%的蛋白屬於植物應對生物脅迫和非生物脅迫蛋白；

2，擬南芥經假單胞桿菌侵染或用禦敵激素水楊酸處理後，植物產生的外泌體數量增加了2倍，表明擬南芥胞外囊泡參與了植物對生物脅迫的響應。

景傑生物通過整合以組學為導向（包括基因蛋白質組學和組蛋白密碼組學）的生物標誌物發現、以生物標誌物為導向的藥物研發、以高質量抗體為基礎的診斷試劑盒開發這三個環節，逐步構建起「疾病精準分層」、「精準藥物研發」、「疾病精準診斷」 三位一體的精準醫療產業化發展的運作鏈條，從而為精準醫療產業化開創出一片廣闊前景, 並開闢出一條可行路徑。

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