建立分析致死基因在不同組織中功能新方法
本報訊（記者黃辛）中科院生化與細胞研究所李勁松研究組和中科院神經科學研究所於翔研究組合作， 一步獲得了Tet3基因敲除的健康嵌合小鼠，並對Tet3基因敲除後大腦皮層發育以及皮層和海馬神經元的突觸傳遞進行了探究。相關研究成果日前發表於《細胞研究》。
Tet3是DNA雙加氧酶Tet蛋白家族的一個重要成員，參與DNA的去甲基化。Tet3全身性敲除小鼠有部分可以發育到出生，但是出生後24小時內死亡。因此，無法快速研究Tet3在成年小鼠不同組織中的功能。
李勁松團隊在mT/mG小鼠胚胎（表達紅色熒光）的1-細胞時期注射了Cas9 mRNA，並在2-細胞胚胎階段對其中一個卵裂球進行Cre mRNA和Tet3 sgRNAs注射。Cre mRNA會使卵裂球變成綠色熒光，同時，Tet3 sgRNAs會突變該卵裂球的Tet3基因。將這些注射過的胚胎移植到假孕小鼠體內，獲得了紅色和綠色細胞均勻分布的嵌合小鼠，並且這些嵌合鼠可以正常存活。基因型鑒定顯示，紅色細胞攜帶野生型Tet3基因，而綠色細胞攜帶突變的Tet3基因。對嵌合小鼠的大腦皮層不同類型細胞的比例進行分析發現，Tet3敲除並不影響大腦皮層主要細胞類型的發育和分化。進一步試驗發現，Tet3敲除之後，小鼠大腦皮層和海馬錐體神經元的興奮性與抑制性突觸傳遞均發生了顯著性的改變，表現為興奮性突觸傳遞的上調和抑制性突觸傳遞的下調，表明Tet3在大腦不同腦區神經環路發育中起到了重要作用。
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