QTL,今天你定位了么?
控制數量性狀的基因在基因組中的位置被稱作數量性狀基因座(quantitative trait loci, QTL),QTL與連續變化的數量性狀表型有密切關係。隨著QTL研究的飛速發展,已經證明,只要是控制連續分布性狀的數量性狀基因座,就能在實驗群體或遠交群體中定位,即利用分子標記與QTL之間的連鎖關係,把目標基因定位在遺傳圖譜上,並分析其遺傳效應。在這種情況下,對QTL的定位越精確,越能夠了解基因間的相互作用,也越有利於篩選農作物的重要經濟性狀。精細定位可以把QTL所在的區間縮短至幾cM的範圍內,對重要經濟性狀篩選具有重要作用。
精細定位的應用
篩選農作物重要經濟性狀
篩選畜禽重要經濟性狀
明確複雜疾病致病位點
精細定位方法——IBD定位
同源相同(identical by descent,IBD)定位主要利用非同源重組率來確定連鎖不平衡,其基本原理是假設性狀的基因可以追溯到若干世代前發生的突變,因而具有相同基因的個體,在該基因周圍應具有相同的染色體片段(即IBD片段或者IBD區域),在世代延續的過程中,由於基因與周圍的標記發生重組,使得該IBD片段的長度不斷縮小,因此,如果能夠找到這樣一個IBD片段,而且該片段足夠小,即可將基因精細的定位於該片段上。
圖1 IBD定位原理
技術路線
案例解析
喬治亞大學的研究團隊通過QTL精細定位和KASP篩選了大豆的線蟲抗性候選基因和標記。研究選取高度易感品系作為親本1,高抵抗性品系作為親本2,以及188個F5:6子代樣本。利用SSR標記對群體樣本基因型進行分析,發現染色體10和染色體18上的主要QTL和次要QTL。為了精細定位10號染色體上的主要QTL,利用SSR確定非同源重組率,鑒定重組事件,將抗性基因的位置預測在235kb區域內,獲得4個候選基因,並最終確定4個候選標記。對4個候選標記進行KASP基因分型技術驗證,驗證樣本為188個子代大豆樣本和236個其他大豆品系,發現這4個候選標記可以有效將群體中的野生型和突變型分開,即這4個候選標記驗證成功,可應用於大豆線蟲抗性的進一步研究中。
圖2 利用非同源重組率精細定位
圖3 KASP驗證結果
參考文獻
Anh Tung Pham, Kaitlin McNally,et al. Fine mapping and identification of candidate genes controlling the resistance to southern root-knot nematode inPI 96354[J].Theoretical and Applied Genetics. 2013, 126(7): 1825-1838.
分子育種業務線 趙桐丨文案
王 迪丨編輯
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