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檢測細胞增殖能力常用的方法為CCK8，是一種基於WST-8的廣泛應用於細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑。它的原理為：WST-8在電子耦合載體1-Methoxy PMS存在的情況下，可以被線粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色甲臢產物，顏色的深淺與細胞的增殖成正比，與細胞毒性成反比。使用酶標儀在450nm波長處測定OD值，間接反映細胞活性。

CCK8法應用非常廣泛，如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤葯敏試驗以及生物因子的活性檢測等。

下面介紹下應用CCK8試劑檢測細胞增殖-藥物毒性檢測步驟

1

種細胞

在96孔板中加入100μL的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養24小時（37℃，5% CO2）。在96孔板的外圍可以選擇加入PBS，防止在培養過程中液體蒸發過多。

2

加藥

向培養板加入待測藥物試劑。

3

細胞培養

將培養板在培養箱孵育一段適當的時間（例如：12、24、48小時）。

4

CCK8檢測

（1）棄去培養基，並用培養基洗滌細胞兩次，然後加入新的100ul培養基，向每孔加入10μLCCK8溶液（最好按照1:10將CCK8試劑以及培養基混勻後加入）。其中預留的PBS空加入CCK8作為空白組（含血清+ CCK8，不含細胞）

（2）將培養板在培養箱內孵育1-4h。

（3）用酶標儀測定在450nm處的吸光度。

細胞活性計算：

細胞活力（％）=[A(加藥)-A（空白）]/[A（0加藥）-A（空白）] ×100

A（加藥）：具有細胞、CCK8溶液和藥物溶液的孔的吸光度。

A（空白）：具有培養基和CCK8溶液而沒有細胞的孔的吸光度。

A（0加藥）：具有細胞、CCK8溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度細胞活力。

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