重視HBsAg突變隱患應對乙肝防治新挑戰

乙肝是危害人類健康的全球性疾病。世界衛生組織（WHO）公布的數據顯示，據估計全球有20億人感染過乙肝病毒（HBV）；2.57億人是慢性HBV攜帶者，其中75%的慢性病例來自亞洲。2015年，乙肝導致了全球88.7萬人死亡，其中大多數死於乙肝併發症（包括肝硬化和肝細胞癌）。

HBV感染檢測常用的血清學標誌物包括表面抗原（HBsAg）及其抗體（抗HBs）、e抗原（HBeAg）及其抗體（抗HBe）、核心抗體（抗HBc）等。其中，HBsAg是感染後首先出現的血清學標誌物，預示價值高，是目前臨床上應用最多的HBV感染血清標誌物，也是WHO公認的判斷HBV感染的關鍵指標。然而，由於HBV病毒的複製特點，以及乙肝疫苗、抗病毒治療的廣泛應用，HBsAg突變率高發為乙肝的檢測與防治帶來了新的挑戰。

近日，「HBsAg突變全球多中心研究解讀媒體會」在滬舉行，國立台灣大學醫學院高嘉宏教授、中國國家衛計委臨床檢驗中心王露楠教授探討了HBsAg突變對臨床及實驗室檢測帶來的挑戰和影響，HBsAg突變全球多中心研究負責人、羅氏診斷全球醫學科學事務部Mikael Gencay博士則分享了該研究成果。

提高HBsAg突變檢出率，儘早發現OBI患者

精準有效的檢測對乙肝的篩查及治療過程中的療效判斷、停葯時機把握、預後監測和隨訪都發揮著重要指導作用。隨著抗病毒藥物療效與乙肝病毒及其血清標誌物水平之間關係的相關研究不斷深入，HBsAg定量檢測的臨床意義日益受到重視。

在乙肝病毒的複製過程中，病毒DNA進入宿主細胞核，在DNA聚合酶的作用下，兩條鏈的缺口均被補齊，形成超螺旋共價閉合環狀DNA（cccDNA），cccDNA是HBV複製的初始模板。血清內HBsAg的水平與cccDNA水平有一定相關性，HBsAg水平的下降不僅反映了cccDNA轉錄或mRNA轉譯的減少，同時也預示著宿主對HBV複製實現了免疫控制。因此，HBsAg水平是抗病毒治療成功的早期指標，其下降速度和幅度可預測治療的長期療效。

研究數據顯示，對於低水平HBV DNA（＜2,000 IU/mL）的患者而言，HBsAg水平是一個重要風險因素。當患者HBsAg水平小於1,000 IU/mL，每年罹患肝癌的風險為0.06%左右；而當HBsAg水平超過1,000 IU/mL時，罹患風險提高了5倍，增至0.33%。

儘管HBsAg具有重要臨床價值，但在實際應用中仍面臨諸多挑戰。由於HBV複製周期快且聚合酶易錯配，在內源性（宿主免疫清除）和外源性（疫苗和抗病毒藥物）的選擇性壓力作用下，容易選擇出逃避突變株。因選擇性及天然產生的、或經治療誘導的前S/S基因組區域突變在慢性HBV感染患者中非常常見。HBsAg突變會導致患者HBsAg檢測結果為陰性，但其血清和/或肝臟中仍存在HBV DNA，這種情況稱為隱匿性HBV感染（OBI）。

國立台灣大學醫學院高嘉宏教授

高嘉宏教授指出：「OBI患者如果作為獻血者或肝移植供體，將會對輸血和手術安全構成重大隱患。同時，HBsAg突變會加速隱匿性乙型肝炎向肝硬化/肝癌進展，並引發免疫抑制後的HBV再激活，導致檢測試劑漏檢、疫苗保護失敗、抗病毒治療失敗等，對疾病進展和療效判斷造成重要影響。因此，臨床需要更精準的檢測，儘早發現這類患者。」

中國國家衛計委臨床檢驗中心王露楠教授

王露楠教授分享了一項針對中國獻血者隱匿性乙肝S基因相關突變的血清學特徵研究。該研究共分析了998份HBsAg-/HBV DNA+樣本，結果顯示：70.3%的樣本HBV DNA定量結果小於20 IU/mL，僅有2.4%的樣本HBV DNA定量值大於200IU/mL；這些樣本中最常見的血清學模式是抗HBc/抗HBe同時陽性，和單獨抗HBc陽性；OBI樣本中最常見的基因型為B和C；有92.24%的OBI樣本發生了突變，高於HBsAg陽性菌株發生突變的情況。

王露楠教授表示：「OBI的發生與S基因突變有關，且OBI患者的突變率更高，這對實驗室檢測能力提出了新的挑戰。血清學檢測試劑的設計不僅要滿足靈敏度和特異性，還要具備HBsAg突變檢測的能力，將漏檢的可能性降到最低。傳統的酶聯免疫吸附試驗（ELISA）的突變檢測能力有待提高。目前結果顯示電化學發光法（ECL）具有優異的HBsAg突變檢出能力。」

真實臨床患者樣本研究力證Elecsys HBsAg檢測性能

羅氏診斷全球醫學科學事務部經理Mikael Gencay博士

會上，Mikael Gencay博士介紹了HBsAg突變全球多中心研究的背景和成果。該研究首次採用真實臨床患者樣本，排除以往使用實驗室製備的「重組」HBsAg蛋白可能存在的潛在偏倚，納入1,553例來自非洲、亞洲、歐洲、美洲、拉丁美洲、中東等全球不同流行地區、且涵蓋各種重要基因型的HBV感染患者樣本，包括來自中國的407例HBV感染患者樣本。

研究發現：超過70%的樣本發生了HBsAg突變，且全球範圍內不同流行地區及不同基因型中總體突變率無顯著差異。其中，大部分中國患者樣本為基因型C，而多位點突變頻率在基因型 C感染的人群中更高。在中國樣本中，還發現了136種特有的突變（全球共345種突變），10餘種新的突變體（全球共62種）；在超過30%的中國患者樣本中發現了47種位於「a」決定簇區域的特有突變，這是對於診斷及臨床都非常重要的區域，可能與宿主免疫反應差有關，也可導致慢性HBV感染，還可導致假陰性診斷結果。除此之外，與G145R突變相關的疫苗及診斷逃逸在中國樣本中的發生比例更高，為4%，而全球比例為2%。

研究還對四種HBsAg商業試劑（包括羅氏診斷Elecsys HBsAg II免疫檢測、兩種基於磁珠顆粒的HBsAg免疫檢測、以及HBsAgELISA檢測）進行了性能比較分析。Elecsys HBsAg II的靈敏度最高，達到99.94%；並成功識別出研究中所有（含突變體）的真實臨床患者樣本，證實了HBsAg突變對該試劑的檢測性能沒有影響。Mikael Gencay博士表示：「研究證明，HBsAg突變在HBV感染患者中非常常見且具有較高的發生率——比之前所報道的數據高出3倍。對存在大量HBsAg突變患者的現狀，使用Elecsys HBsAg II 免疫檢測對患者進行管理是非常安全、可靠的。」

Elecsys HBsAg II 定性和定量檢測試劑均採用獨特的抗原抗體反應體系設計，並使用3種單克隆抗體和1種多克隆抗體的組合，能夠檢測到目前所有已知的HBV血清型，並有利於提高HBsAg突變的檢出能力，對於HBV感染的篩查、診斷和監測具有重要價值。

檢驗醫學?中華檢驗醫學網

全國最具影響力的檢驗醫學新媒體平台

喜歡這篇文章嗎？立刻分享出去讓更多人知道吧！

本站內容充實豐富，博大精深，小編精選每日熱門資訊，隨時更新，點擊「搶先收到最新資訊」瀏覽吧！

請您繼續閱讀更多來自 乙肝 的精彩文章: