現在可以明確的是光緒帝確實是被毒死的(經過考古專家對光緒帝陵開棺檢驗得知，光緒帝的衣領和頭髮含有大量砒霜，通過大量的計算結果得出光緒帝是死於砒霜中毒的)，但是是不是慈禧毒死的不得而知。

一、是被慈禧太后毒死的

慈禧與光緒的矛盾積來已久，慈禧在戊戌變法後將光緒帝囚禁起來，打算廢掉他，但是士紳和洋人沒有同意，因此慈禧心中很痛恨光緒，慈禧太后病危時，深怕自己死後被她廢掉的光緒重新掌政，繼續推行維新變法，所以指使太監嚇得下毒手，把光緒皇帝害死，以絕後患。

二、被袁世凱毒死的

溥儀的《我的前半生》記載說是袁世凱下毒致死，原文如下：「我還聽到一個叫李長安的老太監說起光緒之死的疑案，照他說，光緒在死的前一天還是好好的，只是因為用了一劑葯就壞了，後來才知道這劑葯是袁世凱使人送來的。」

三、被李蓮英毒死的

《清室外記》記載上懷疑是李蓮英下毒致死：「皇帝賓天之情形及其得病之由，外人無由詳知，惟藏於李蓮英輩之心中。」宮中女官的德齡所著的《瀛台泣血記》也是這種說法。

這幾種說法中，慈禧的嫌疑最大，因為在光緒帝死亡的前一天，清廷以光緒的名義發了兩道命令。第一道是將溥儀接進宮教養，第二道是任溥儀之父為攝政王。當時光緒帝已經被囚禁了，完全沒有權利，他不可能來任命自己的接班人，所以所有的說法都指向了慈禧。

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