用於禽流感病毒亞型高效檢測的多分析物懸浮晶元檢測法的研究
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用於禽流感病毒亞型高效檢測的多分析物懸浮晶元檢測法的研究
作者:李軼, 倪龍泉, 陳建軍, 楊娟, 鄧菲, 王華林
單位:
中國科學院武漢病毒研究所
摘要:巨大的經濟損失和越來越多的已報道的鳥傳人的傳播病例警示我們要對自然疫源地的禽流感病毒監測引起重視。然而,常用檢測技術PCR和real-time PCR的有限檢測能力使得現有的監測不全面、昂貴以及費力。在這項研究中,我們基於Luminex xMAP技術,設計了一套多分析物懸浮試驗(MASA)來檢測AIV的多種亞型。在這個實驗中,有7個HA和5個NA亞型能在同一個反應中被區分檢測出來。驗證數據顯示,這些亞型特異的擴增引物具有很高的特異性,並且每對引物對的亞型覆蓋率高達82%至97%。我們的研究為自然疫源地的禽流感病毒監測提供了一種快速和經濟的方法。
Abstract:Enormous economic losses and reported cases of bird-to-human transmission alert us the importance of AIVs surveillance in natural foci. However, the limited multiplexing capacity of PCR or real-time PCR method made AIVs surveillance insufficient, costly and labor intensive. In this study, we developed a multi-analyte suspension assay (MASA) to detect AIVs subtypes based on Luminex xMAP technology. With this MASA, 7 HA and 5 NA subtypes could be identified in a single reaction. The evaluation data showed that these subtype-specific amplified primers had high specificity and the coverage of each primer pairs ranged from 82% to 97%. Our studies provide a rapid and economical method for AIVs surveillance of natural foci.
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