暨南大學，中科院等發表《Cell》文章：利用CRISPR構建世界首例神經疾病基因敲入豬

暨南大學，中科院廣州生物醫藥與健康研究院等處的研究人員首次利用基因編輯技術（CRISPR/Cas9）和體細胞核移植技術，成功培育出世界首例亨廷頓舞蹈病基因敲入豬，精準地模擬出人類神經退行性疾病。

這一研究成果公布在3月29日的Cell雜誌上。文章的通訊作者為暨南大學粵港澳中樞神經再生研究院李曉江教授，廣州生物醫藥與健康研究院賴學良教授，以及美國埃默里大學李世華教授。第一作者為閆森副研究員和塗著池博士和劉朝明。

亨廷頓舞蹈症、阿爾茨海默病、帕金森病、肌萎縮側索硬化症等均是因為蛋白質的錯誤摺疊而導致神經細胞死亡，是當今社會嚴重威脅人類健康的神經退行性疾病。這些疾病伴隨年齡漸長而產生、可遺傳、呈漸進性發展，由於缺乏合適的動物模型進行藥物篩選，目前尚無有效治療方法。

亨廷頓舞蹈病是由單基因（HTT）突變導致的神經退性疾病，這是一個理想的疾病模式，可用於研究蛋白質錯誤摺疊如何引起選擇性的神經退性病變，是研究多基因突變病症的基礎。

建立準確模擬疾病病理及表型的動物模型，對開發治療疾病的有效手段至關重要。小鼠作為最常見的動物模型，已被廣泛用於研究人類疾病機理和尋找臨床治療方法。但已有研究發現，表達突變基因的神經退行性疾病小鼠模型，並不能表現出像病人腦中一樣的典型神經細胞死亡的重要病理特徵。因此，許多有治療效果的藥物在小鼠模型中有效，在臨床上對病人卻無效。

2010年，這一團隊建立了首例轉基因亨廷頓舞蹈病的豬模型。然而，轉基因模型由於表達外源性致病基因片段的毒性過強，出生不久後死亡，不能將致病基因傳代，嚴重限制了科學家們對其進一步探索和研究。

在此基礎上，研究人員利用基因編輯（CRISPR/Cas9）技術，精準地將人突變的亨廷頓基因，即人外顯子1中包含150 CAG重複序列精確地插入豬的HTT內源性基因中，利用成纖維細胞篩選出陽性克隆細胞，並通過體細胞核移植技術，成功培育出亨廷頓舞蹈病的基因敲入豬模型，在國際上首次建立了與亨廷頓舞蹈病人突變基因相似的大動物模型，出現明顯的神經元凋亡。

亨廷頓基因敲入豬模型製備流程圖

這項研究為開發治療亨廷頓舞蹈病新手段提供了穩定、可靠的動物模型，也為製備其它神經退行性疾病大動物模型提供了技術範本和理論依據，這也是國際上首次建立了與神經退行性病人突變基因相似的大動物模型。

研究發現，該模型不僅能模擬亨廷頓舞蹈症病人在大腦中特異神經元選擇性死亡的典型病理特徵，而且表現出類似亨廷頓舞蹈病「舞蹈樣」的異常行為。更重要的是，這些病理特徵及異常行為都可以穩定地遺傳給後代。該研究為開發治療亨廷頓舞蹈病新手段提供了穩定、可靠的動物模型，也為製備其它神經退行性疾病大動物模型提供了技術範本和理論依據。

原文標題

A Huntingtin Knockin Pig Model Recapitulates Features of Selective Neurodegeneration in Huntington』s Disease

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