腸內營養對艾滋病患者腸道生物屏障影響的研究

艾滋病是由人類免疫缺陷病毒(HIV)引起的慢性疾病。我國艾滋病近年來的發病率呈上升趨勢，雲南已成為全國HIV感染的重災區。AIDS具有極高的病死率，複雜的臨床癥狀、較多併發症等特點。HIV感染能破壞宿主腸道粘膜屏障，腸道細菌移位引起多器官感染，感染髮生後很難控制，最終導致多器官功能衰竭死亡。微生物移位可致宿主免疫系統過度活化，影響了AIDS患者疾病的進程。因此，研究AIDS患者在腸內營養干預下腸道生物屏障的變化，具有重要意義。

一、材料和方法

AIDS患者30例，男17例，女13例，年齡(36。2±6。5)歲。本組患者均無嚴重全身性疾病，無腸道疾病，未使用微生態製劑或抗生素於採樣前，於口服腸內營養前和服後4周時採樣。

根據cfxA基因設計擬桿菌屬引物，16 S rRNA基因設計雙歧桿菌引物，參照Skansen gB等報道梭菌屬引物，Byun等l5報道乳酸桿菌引物，Kato H等報道梭桿菌引物，核實其特異性後進行合成(見表1)。

用天平稱取自然排便時新鮮中段糞便，每份0.5g，收集於男性試管中，取回實驗室，經過預處理，應用糞便DNA提取試劑盒，進行糞便細菌DNA提取。

二、結果

擴增曲線：細菌定量分析曲線，由基線期，對數期及平台期組成，呈「S」型，表示不同拷貝數的模板循環數與熒光強度的關係圖。其中對數期是熒光信號指數擴增階段，細菌的定量在對數期進行(見圖1)。

溶解曲線：細菌的溶解曲線表示細菌引物特異性的曲線。各標本經擴增後均為單峰，與熒光染料結合的為目的DNA片段，說明擴增產物為單一細菌(見圖2)。

糞便的細菌定量結果：艾滋病患者服用腸內營養4周後，糞便中乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬細菌數量明顯升高，梭桿菌屬、擬桿菌屬及梭菌屬細菌數量明顯降低，差異均有統計學意義（見表2）。

三、討論

艾滋病是嚴重威脅人民健康的疾病，常引起腸道微生態的失調。人體腸道中含有約10個細菌，約佔人體微生物總量的78％，細菌的組成和功能對人體健康和疾病起著重要的作用。腸道菌群通過複雜代謝網路的編譯參與調節人體正常的新陳代謝，對維生素的合成和食物的消化吸收具有加強作用，同時在腸上皮細胞分化成熟和腸道免疫系統激活中起促進作用。正常生理狀態下腸道粘膜免疫系統、腸道菌群和腸粘膜上皮細胞相互作用，維持腸道菌群平衡。自身免疫性疾病或病理性感染會由腸道菌群失衡引起。

腸內營養具有全面、均衡，符合生理，維護胃腸道功能，保護肝臟功能，提高機體免疫力，降低高分解代謝，經濟又安全等優點。有效的腸內營養在補充艾滋病患者的能量、蛋白質、維生素和礦物質的同時可以優化免疫系統的功能，減少感染的發生，改善患者癥狀及體征，恢復腸道微生態，改善預後。

本研究結果顯示：艾滋病患者服用腸內營養前糞便中乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬細菌數量明顯降低，梭桿菌屬、擬桿菌屬及梭菌屬細菌數量明顯升高，與Saxena等人研究HIV感染者腸道菌群的預試驗結果相一致，服用腸內營養4周後，糞便中乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬細菌數量明顯升高，梭桿菌屬、擬桿菌屬及梭菌屬細菌數量明顯降低，說明腸內營養對艾滋病患者腸道生物屏障具有調節和保護作用。

四、結論

腸內營養具有保護艾滋病患者腸道生物屏障的功能，本研究實現了對梭桿菌屬、梭菌屬、乳酸桿菌屬、擬桿菌屬及雙歧桿菌屬等難培養細菌進行定量分析。本研究揭示了艾滋病患者腸道菌群經腸內營養干預後有明顯的改善，為進一步探討腸道菌群在AIDS各個疾病進程階段的作用提供生物醫學意義，為艾滋病腸內營養的相關研究及治療奠定理論依據。

原作者：黃映光 郭世奎 龔昆梅 包維民

作者單位：昆明理工大學附屬醫院／雲南省第一人民醫院（黃映光 郭世奎 龔昆梅 包維民）；

昆明醫科大學第一附屬醫院（王昆華）；

昆明醫科大學第二附屬醫院（陳嘉勇）

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