動物體內生物分布實驗案例告訴你,如何避免這些誤區
一、實驗目的
1. 學習小鼠的抓取固定方法、尾靜脈注射、小鼠的處死及小鼠的間剖實驗等基本技能。
2. 學會動物分布實驗的數據處理。
二、實驗原理
1、小鼠品種選擇:
小鼠的品種和品系很多,是實驗動物中培育品系最多的動物。在微生物和各種實驗研究中,以小白鼠最為普遍,有英國種、法國種、德國種和瑞士種等,而以瑞士種最著名。目前我國各生物製品、醫學研究單位繁育的小白鼠為昆明種,該品係為封閉種群,最早在抗日戰爭時期從緬甸而來,在雲南昆明繁殖,經過多年培育繁殖而成,該品系小鼠體型較大,繁殖力強。
2、 小鼠尾靜脈注射練習:
靜脈注射時,用小鼠尾靜脈注射架固定,先根據動物大小選擇好合適的固定架,並打開鼠筒蓋,手提鼠尾巴,讓動物頭對準鼠筒口並送入筒內,調節鼠筒長短合適後,露出尾巴,固定筒蓋即可進行尾靜脈注射或尾靜脈采血等操作。
尾靜脈注射時,鼠尾靜脈在背側和腹側各一根,背側比較容易固定,多採用。操作時先將動物固定在鼠筒內或扣在燒杯中,使尾巴露出,尾部用45~50℃的溫水浸潤半分鐘或用酒精擦拭使血管擴張(也可用一米距離外紅外燈烤半小時),並可使表皮角質軟化,以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側,使靜脈充盈,用中指從下面托起尾巴,以無名指和小指夾住尾巴的末梢,右手持注射器連4(1/2)號細針頭,使針頭與靜脈平行(小於30℃),從尾下四分之一處(約距尾尖2-3厘米)處進針,此處皮薄易於刺入,先緩注少量藥液,如無阻力,表示針頭已進入靜脈,可繼續注入。注射完畢後把尾部向注射側彎曲以止血。如需反覆注射,應儘可能從末端開始,以後向尾根部方向移動注射。
三、實驗儀器與試劑
主要儀器:放射性活度計, FW-2000鍀分析儀,天平,1 ml一次性注射器,解剖 工具,毛細管,聚醯胺薄片,燒杯等。
主要試劑:Na99mTcO4淋洗液,生理鹽水,乙腈,MDP藥盒等。
四、實驗步驟
將2ml生理鹽水注入MIBI藥盒,振蕩使充分溶解。加入0.3ml約1.1mCi新鮮淋洗的99mTcO4-溶液,振蕩使混合均勻,室溫靜置15min。以生理鹽水-聚醯胺薄膜體系檢測標記率。用生理鹽水將藥物99mTc-MIBI稀釋至約200μCi/ml。 取6隻約18-20g的昆明小白鼠,尾靜脈注射0.1ml(約25μCi)的99m Tc-MIBI(放射化學純度大於90%),分別在注射後5、30、和60 min將小鼠斷頭處死,取出心、肝、肺和血等組織,稱重並用鍀分析儀測其放射性計數,計算每克組織的放射性攝取率XID/g=[(A組織/A注)×100%]/m組織
五、實驗結果
本次實驗,由於操作不熟練,無法及時有效的完成實驗內容,因而我們沒有得到實驗有效數據,只是進行了抓取固定方法、小鼠靜脈注射、處死及解剖的練習。
六、問題討論
1. 在做動物體內生物分布實驗時需要特別注意哪些事項?
答:需要注意的事項有:
1)注射時應排盡注射器內的氣泡;
2)如需反覆注射,應儘可能從末端開始,以後向尾根部方向移動注射;
3)注射完畢後,應先用棉花堵住傷口,再拔針,以免藥液漏出;
4)取血時,應避免取到尿液。取一次血,換一個滴管;
5)血液應儘快稱重,以免其揮發後引入誤差;
6)解剖完一個器官後或組織後,應擦拭鑷子等器具,以防止上面的殘留物 影響其他數據。
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