「DNA粗提取與鑒定」實驗的延伸

1問題的提出：按照人教社選修1《生物技術與實踐》對「DNA粗提取與鑒定」

實驗的描述，「溶液中會出現乳白色絲狀物，這就是粗提取生物DNA。用玻璃棒

沿一個方向攪拌，捲起絲狀物（圖5-4），並用濾紙吸去上面的水分。」（見教材

56頁）但從圖中可以看到，我們捲起的並非白色絲

狀物，而是淡黃色的粘稠物。事實上，我們發現，

教師和學生實驗過程中最終提取的經常是這種粘稠

物。儘管這種淡黃色的粘稠物並不影響我們對DNA

的鑒定，但為什麼實驗結果與描述不符呢？我們推

測這可

能是提取物中含有大量蛋白質造成的，這也

許就是我們為什麼稱之為「粗提取」的原因吧！

那麼，我們如何證明這一推測呢？

2實驗材料用具、原理和方法步驟：

2.1材料用具：DNA粗提物、2mol/LNaCl溶液、雙縮脲試劑(A液：質量濃度為

0.1g/mL的NaOH溶液；B液：質量濃度為0.01g/mL的CuSO4溶液)、試管、量

筒、滴管、玻璃棒。

2.2實驗原理：蛋白質可與雙縮脲試劑發生顏色反應：肽鍵（—CO—NH—）在

鹼性條件下與Cu2+作用形成紫色絡合物——雙縮脲反應。

2.3方法步驟：

第一步：用量筒分兩次各量取2ml 2mol/LNaCl溶液，分別注入A、B兩支試管

中，然後將玻璃棒上的DNA粗提物在B試管中輕輕攪動，至完全溶解。

第二步：向兩試管內各注入雙縮脲試劑A 1ml，搖勻(創設鹼性條件)，再用滴管

向兩試管內分別滴加雙縮脲試劑B 4滴，輕輕地振蕩搖勻。

第三步：觀察A、B兩試管中出現的顏色變化。

3實驗結果：A試管呈現淡藍色（氫氧化銅），B試管呈現紫色（見照片）。說明DNA粗提物（粘稠物）中含有大量蛋白質。

4問題討論：

4.1如果DNA粗提物（粘稠物）不用

2mol/LNaCl溶液溶解，而是直接注入雙縮

脲試劑A 1ml，再滴加雙縮脲試劑B 4滴，

也會出現紫色反應（見照片中C試管）。

但由於DNA粗提物（粘稠物）為固體狀態，

注入雙縮脲試劑A 1ml後，粘稠物皺縮（原因不清楚），導致顏色偏深棕色，影

響實驗效果。

4.2DNA粗提取的方法不同、實驗材料不同、操作步驟不同等都會影響粗提物中

蛋白質的含量，從而影響實驗的結果。例如，實驗發現，使用雞血提取DNA的

效果要比菜花、洋蔥好（即粗提物中蛋白質含量相對較少），但菜花和洋蔥取材

方便，操作相對簡單。

備註：王玥老師協助完成實驗，特此感謝！

參考文獻

1《生物技術與實踐》，人民教育出版社，2007年1月第2版，第56頁

2《分子與細胞》，人民教育出版社，2007年2月第2版，第18至19頁

3《高中生物新課程探究實驗指導》，人民教育出版社，2007年2月第1版，第167至168

頁

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